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  • 引物合成訂購(gòu)表

  • 引物設(shè)計(jì)軟件都可以給出Tm,與引物長(zhǎng)度、堿基組成、引物使用緩沖的離子強(qiáng)度有關(guān)。長(zhǎng)度為25mer以下的引物,Tm計(jì)算公式為:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)對(duì)于更長(zhǎng)的寡聚核苷酸,Tm計(jì)算公式為:Tm =···

  • 如果溶解引物的水PH過(guò)低或污染了菌或核酸酶,會(huì)使引物降解。使用時(shí)沒(méi)有充分解凍混合,液體不均勻也可能會(huì)造成引物加入量不準(zhǔn)確。建議分裝引物,避免反復(fù)凍溶。建議使用10mMTris pH7.5緩沖液溶解···

  • 引物應(yīng)該全是DNA,但是OD260/OD280的比值為什么那么低,怎么會(huì)有蛋白質(zhì)污染?引物化學(xué)合成,哪里有機(jī)會(huì)污染到蛋白質(zhì)?需要指出的是OD260/OD280的比值不能用來(lái)衡量引物的純度。OD260/OD280的比值···

  • 引物設(shè)計(jì)的下列原則供您參考?!粢镩L(zhǎng)度一般在18-35mer。◆G-C含量控制在40-60%左右。◆避免近3’端有酶切位點(diǎn)或發(fā)夾結(jié)構(gòu)?!羧绻赡鼙苊庠?’端最后5個(gè)堿基有2個(gè)以上的G或C?!羧绻赡鼙苊庠凇ぁぁ?/p>

  • 下列原則供您參考?!鬞aqMan探針位置盡可能靠近擴(kuò)增引物(擴(kuò)增產(chǎn)物50-150bp),但不能與引物重疊。◆長(zhǎng)度一般為18-40mer?!鬐-C含量控制在40-80%左右?!舯苊膺B續(xù)相同堿基的出現(xiàn),特別是要避免G···

  • 遇到這種情況,首先和核酸合成廠家取得聯(lián)系,生產(chǎn)人員會(huì)檢查生產(chǎn)的原始記錄,主要是核對(duì)合成序列是否和定單一致,他們?cè)陔娔X中一般會(huì)保留所有原始數(shù)據(jù)。在確認(rèn)引物合成序列沒(méi)有輸錯(cuò)的情況下,建···

  • 測(cè)序發(fā)現(xiàn)引物區(qū)域有突變,特別是40個(gè)堿基以下的引物,發(fā)生的概率不大,但是肯定也會(huì)發(fā)生。用戶一般可以放心,引物序列一般都是通過(guò)電腦直接將您的序列COPY到合成儀的,堿基輸錯(cuò)的機(jī)會(huì)不多。核酸合···

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